莲藕多酚氧化酶与底物或抑制剂相互作用的光谱学研究

来源期刊：分析试验室2010年第8期

论文作者：李春美 胡婉峰 杨立 杨杰

文章页码：13 - 17

关键词：莲藕多酚氧化酶;底物;抑制剂;圆二色谱;荧光光谱;

摘    要：本文研究了纯化的莲藕多酚氧化酶（PPO）与底物和抑制剂相互作用时的二级结构变化。园二色谱分析表明莲藕PPO主要含有α-螺旋和β-折叠结构。与抑制剂作用后,莲藕PPO活性显著降低,同时伴随其二级结构中α-螺旋结构明显减少,表明莲藕PPO的活性中心可能位于α-螺旋结构中。荧光分析表明,莲藕PPO与邻苯三酚（pyrogallic acid,PA）作用后,酪氨酸残基荧光强度略有降低,λmax位移不明显,色氨酸残基荧光强度略有降低,λmax红移2 nm;而与莲藕多酚（Lotus root polyphenol,LRP）作用后,莲藕PPO分子中酪氨酸（Tyr）和色氨酸（Trp）残基荧光强度显著提高,且其最大发射波长分别蓝移6nm和红移5nm。当加入异Vc钠后,Tyr和Trp残基最大发射峰显著红移,说明Trp和Tyr残基位于一定的疏水环境对维持PPO催化活性的优势构象至关重要。