酶解反应-柱前衍生-高效液相色谱法测定高淀粉类食品中的牛磺酸
来源期刊:理化检验-化学分册2013年第9期
论文作者:刘柱 陈万勤 王瑾 张东雷 陈小珍
文章页码:1079 - 1082
关键词:高效液相色谱法;酶解反应;柱前衍生;牛磺酸;高淀粉类食品;
摘 要:5.000 g高淀粉类食品中加入不少于1mg的高温α-淀粉酶(37.2U·mg-1)于60℃酶解反应20min,所得酶解产物经丹磺酰氯在50℃下进行衍生化,所得牛磺酸的衍生物用高效液相色谱法分析。选用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,以pH 7.2乙酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比75比25混合所得溶液为流动相进行淋洗,于波长247 nm处进行检测。牛磺酸的色谱峰面积与其质量浓度在90 mg·L-1以内呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3mg·kg-1。在4个浓度水平下做加标回收试验,酶解反应后衍生所得回收率在95.3%101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%1.5%之间。
刘柱,陈万勤,王瑾,张东雷,陈小珍
浙江省质量检测科学研究院
摘 要:5.000 g高淀粉类食品中加入不少于1mg的高温α-淀粉酶(37.2U·mg-1)于60℃酶解反应20min,所得酶解产物经丹磺酰氯在50℃下进行衍生化,所得牛磺酸的衍生物用高效液相色谱法分析。选用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,以pH 7.2乙酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比75比25混合所得溶液为流动相进行淋洗,于波长247 nm处进行检测。牛磺酸的色谱峰面积与其质量浓度在90 mg·L-1以内呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3mg·kg-1。在4个浓度水平下做加标回收试验,酶解反应后衍生所得回收率在95.3%101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%1.5%之间。
关键词:高效液相色谱法;酶解反应;柱前衍生;牛磺酸;高淀粉类食品;