镥铕共发光时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌

谢东琴，冯建军，郭松林，王艺磊，王淑红，林鹏

集美大学水产学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心农业部东海海水健康养殖重点实验室

摘 要：建立了共发光时间分辨荧光免疫检测嗜水气单胞菌的新方法,以嗜水气单胞菌菌株B11包被微孔板,与Eu³⁺标记的兔抗IgG免疫反应后,加入含有共发光离子Lu³⁺的解离增强剂,由于Eu³⁺和Lu³⁺络合物的共发光效应,时间分辨荧光大大增强,有效放大了检测信号,提高了检测灵敏度。优化了共发光体系的条件,方法的检出限为1.0×10³cfu/mL,在1×10³～5×10⁶cfu/mL范围内线性关系良好,相关系数0.994,不同血清型的嗜水气单胞菌以及其它菌株均呈阴性。板内和板间的相对标准偏差分别为2.9%和3.0%。用该法检测了35份人工感染的日本鳗鲡组织样品,阳性检出率为100%,高于直接时间分辨荧光免疫法和ELISA法。共发光时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌,快速灵敏,具有良好的应用前景。

关键词：共发光;时间分辨荧光免疫;嗜水气单胞菌;日本鳗鲡;水产养殖;