HPLC柱前衍生法测定蛋白粉中N-乙酰神经氨酸的含量

来源期刊：分析试验室2020年第9期

论文作者：程岁寒 冯雪萍 潘存锋 张彦

文章页码：1071 - 1074

关键词：N-乙酰神经氨酸;HPLC;透析袋;

摘    要：建立了保健食品蛋白粉中N-乙酰神经氨酸（Neu5Ac）含量测定的高效液相（HPLC）柱前衍生方法。利用透析袋释放Neu5Ac并除去样品中的大分子蛋白质,以邻苯二胺为衍生剂,80℃水浴衍生1 h,采用高效液相紫外检测器进行检测。采用Intersil ODS-3 C₁₈色谱柱,流动相:乙腈-1%的四氢呋喃水溶液（含0.2%磷酸）（8:92,V:V）,检测波长为227 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为50μL。Neu5Ac在2.008～20.080 mg/L范围内峰面积与测定浓度呈良好的线性关系,回归曲线为:y=-7541.5x+25303,r=0.9991,方法检出限为0.2 mg/L,Neu5Ac平均回收率为101.5%,RSD为2.7%（n=6）。室温下,Neu5Ac衍生溶液在12 h内稳定。测定3批样品中Neu5Ac的平均含量为:99.4～103.0 mg/100 g。该方法适用于富含蛋白质的保健食品中Neu5Ac的含量测定。