基于核酸适配体/苝酰亚胺的非标记荧光技术检测甲基苯丙胺

张天源¹，郝红霞²，杨瑞琴¹

1. 中国人民公安大学刑事科学技术学院2. 证据科学教育部重点实验室(中国政法大学)2011司法文明协同创新中心

摘 要：运用能特异性识别甲基苯丙胺的核酸适配体作为识别元件,通过合成水溶性苝酰亚胺衍生物(PBIs)作为荧光探针,构建了一种非标记的适配体荧光检测方法,用于高灵敏度、高选择性检测甲基苯丙胺。当没有靶标甲基苯丙胺时,Exo I将卷曲的适配体降解成寡核苷酸片段,探针PBIs不发生聚集,体系荧光信号基本不变;当甲基苯丙胺存在时,与适配体结合形成稳定结构,从而抵抗了Exo I的降解作用,带负电的适配体/甲基苯丙胺复合物使探针PBIs发生聚集,由于聚集诱导猝灭效应,体系荧光强度骤降。基于以上原理,实现了甲基苯丙胺的高灵敏度、选择性检测。探针PBIs浓度为5μmol/L、适配体浓度0. 8μmol/L、Exo I酶切时间40 min为检测甲基苯丙胺的最佳条件,该方法的检出限为436. 7 nmol/L。

关键词：核酸适配体;水溶性苝酰亚胺衍生物;Ⅰ型核酸外切酶;甲基苯丙胺;