毛细管电泳-激光诱导荧光法检测HSP70-2基因多态性研究

来源期刊：分析试验室2014年第10期

论文作者：阮佳 李永儒 孙成均 周琛 李永新

文章页码：1135 - 1138

关键词：HSP70-2基因;基因多态性检测;毛细管电泳-激光诱导荧光检测;

摘    要：建立了HSP70-2基因多态性的毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）检测方法。采用试剂盒法提取人血清标本中全基因组DNA作为模板,选择特异引物进行PCR扩增反应,产物用Pst I限制性内切酶酶切;酶切产物用高灵敏度的SYBR Gold荧光染料标记后,用毛细管电泳-激光诱导荧光法检测。在优化的毛细管电泳-激光诱导荧光条件下,酶切产物在25 min内即可完成检测。GeneRular 100bp DNA ladder在同一天内连续测定6次,迁移时间和峰面积的RSD分别为1.8%².9%和2.8%⁷.9%;连续6日测定迁移时间与峰面积的RSD分别为2.1%⁴.3%和3.5%⁹.3%。本研究共检测200份样品,其中G/G分型3份,A/G分型25份,A/A分型172份,检测结果与凝胶电泳结果一致。CE-LIF检测方法具有电泳时间短、试样消耗少、绿色环保等优点,能用于HSP70-2基因多态性的检测。