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基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备

来源期刊:分析试验室2019年第4期

论文作者:张艳梅 李凤 赵晓燕 赵志勇 周昌艳 康经武

文章页码:434 - 437

关键词:毛细管固定化酶微反应器;乙酰胆碱酯酶;毛细管电泳;

摘    要:制备了一款开管式乙酰胆碱酯酶(ACHE)毛细管酶微反应器。该制备方法中,首先在毛细管内壁修饰上末端带有双键的硅烷化试剂,再采用N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺作为功能单体,通过自由基聚合将其修饰在毛细管内壁上,最后通过共价键合的固定化方式,十分简便地实现了毛细管内壁的ACHE固定化。测试连续制备的6个ACHE酶微反应器,其产率的相对标准偏差(RSD)在3%以下;制备的ACHE酶微反应器在1 min孵育时间里的产率高达45%左右,可以较快进行酶活测试,每次分离仅需2. 5 min,10 h内重复使用40次后仍然能够保持酶活性,表明制备的ACHE酶微反应器具有较好的重复利用性和较高的酶活性。

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基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备

张艳梅1,李凤2,赵晓燕1,赵志勇1,周昌艳1,康经武3

1. 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所2. 西安文理学院化学工程学院3. 中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室

摘 要:制备了一款开管式乙酰胆碱酯酶(ACHE)毛细管酶微反应器。该制备方法中,首先在毛细管内壁修饰上末端带有双键的硅烷化试剂,再采用N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺作为功能单体,通过自由基聚合将其修饰在毛细管内壁上,最后通过共价键合的固定化方式,十分简便地实现了毛细管内壁的ACHE固定化。测试连续制备的6个ACHE酶微反应器,其产率的相对标准偏差(RSD)在3%以下;制备的ACHE酶微反应器在1 min孵育时间里的产率高达45%左右,可以较快进行酶活测试,每次分离仅需2. 5 min,10 h内重复使用40次后仍然能够保持酶活性,表明制备的ACHE酶微反应器具有较好的重复利用性和较高的酶活性。

关键词:毛细管固定化酶微反应器;乙酰胆碱酯酶;毛细管电泳;

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