季铵盐壳聚糖及其纳米粒子作为基因载体的研究
来源期刊:材料导报2013年第2期
论文作者:刘璠娜 饶华新 张子勇
文章页码:44 - 114
关键词:季铵盐壳聚糖;基因载体;转染;
摘 要:评价N,N,N-三甲基壳聚糖盐酸盐(TMC)及其纳米粒子对质粒DNA(pDNA)的负载及保护能力,考察了其纳米复合物对人类肝癌细胞株(HepG 2细胞)的转染能力。通过复凝聚法制备TMC/pDNA纳米粒子,并采用透射电镜及原子力显微镜表征粒子形态和粒径;采用凝胶阻滞分析观察其对pDNA的保护情况;采用四噻氮唑盐(MTT)比色法测定细胞毒性;以Lipofectamine 2000转染试剂作为阳性对照,检测其对HepG 2细胞的转染活性;采用荧光倒置显微镜观察转染情况。结果表明负载pDNA的TMC纳米粒子多呈球形,粒径为100~300nm,能有效地包裹和保护基因不被DNaseⅠ酶消化;当TMC与pDNA的质量比为10∶1时,在48h达到最高的转染效率。
刘璠娜1,饶华新2,张子勇2
1. 暨南大学附属第一医院肾内科2. 暨南大学理工学院
摘 要:评价N,N,N-三甲基壳聚糖盐酸盐(TMC)及其纳米粒子对质粒DNA(pDNA)的负载及保护能力,考察了其纳米复合物对人类肝癌细胞株(HepG 2细胞)的转染能力。通过复凝聚法制备TMC/pDNA纳米粒子,并采用透射电镜及原子力显微镜表征粒子形态和粒径;采用凝胶阻滞分析观察其对pDNA的保护情况;采用四噻氮唑盐(MTT)比色法测定细胞毒性;以Lipofectamine 2000转染试剂作为阳性对照,检测其对HepG 2细胞的转染活性;采用荧光倒置显微镜观察转染情况。结果表明负载pDNA的TMC纳米粒子多呈球形,粒径为100~300nm,能有效地包裹和保护基因不被DNaseⅠ酶消化;当TMC与pDNA的质量比为10∶1时,在48h达到最高的转染效率。
关键词:季铵盐壳聚糖;基因载体;转染;